1. 取2 ml 的弗氏完-全佐劑加到2 ml 的溶于PBS的純化抗原中，使之乳化。用3 ml 注射器抽取此乳化液，接上22G注射針頭，排出注射器中的氣泡。

2. 將兔子敢在固定架上，用一只手抓住兔的頸背部毛皮，另一只手托住兔的后腿及臀部，將兔束緊固定以使后肢不能伸張，用70%乙醇對所要注射的區(qū)域進行清潔消毒，在后肢大腿肌肉內進針約1 cm 深，毎條大腿肌肉內最多注射0.5 ml 乳化液。

3. 四周后，用1 mg 的混溶干弗氏不完-全佐劑的抗原乳化液（1：1）對兔進行肌肉內加強免疫注射，操作步驟同1和2，初次加強免疫后2周再次進行加強免疫注射。

4. 第二次加強免疫注射10天后，從兔的耳緣靜脈處放血。

（1）先將兔固定在固定架上（固定緊），使其耳朵伸出，用70%乙醇洗潔消毒一側耳朵。

（2）將兔耳置于熱燈之下，用手指輕輕地拍打兔耳；1~2 min 內兔耳上的血管即會充分地充盈。

（3）用一消毒過的解剖刀 的鋒尖在兔耳緣靜脈上迅速劃一長約0.5 cm 的小口，收集兔血于50 ml 的塑料離心管中，直至傷口不再流血為止。

（4）使兔血順管壁下落，以避免發(fā)生溶血。