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    進口胎牛血清實驗時出現(xiàn)的黑點是怎么回事?

    發(fā)布時間: 2021-12-04  點擊次數(shù): 1330次
       進口胎牛血清FBS是細胞培養(yǎng)中使用最多的生長因子,因為它含有高水平的營養(yǎng),用于哺乳動物細胞培養(yǎng)以生產(chǎn)抗體、抗原、干細胞和疫苗的含血清和血清減少培養(yǎng)基的配制。用于免疫測定和印跡的封閉劑,所有胎牛血清都是*可追溯的,并且來自經(jīng)過審核的供應商。在單獨容器中處理FBS,并對其進行三次0.1μ無菌過濾,消除了任何交叉污染的可能性。
      胎牛血清細胞培養(yǎng)過程中一旦發(fā)現(xiàn)有黑點出現(xiàn),首先要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁;然后在鏡下觀察培養(yǎng)細胞生長的狀態(tài),黑點是否游動。如果細胞被污染,微生物則會大量繁殖,培養(yǎng)基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。
      如果在鏡下觀察細胞,生長狀態(tài)良好,與黑點出現(xiàn)前相比,沒有任何變化,那么可能與以下幾種情況有關:
      1.細胞生長過老,破碎的細胞殘??;
      2.血清質(zhì)量不好,反復凍融的結(jié)果;
      3.配制培養(yǎng)基的pH值偏高,不宜細胞生長;
      4.配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格??蓱秒x心、過濾的方法去除這些黑點;
      5.培養(yǎng)原代細胞中出現(xiàn)小黑點,可能是原代組織中的雜質(zhì),多次傳代可以消除。
      胎牛血清細胞培養(yǎng)中如何防止黑點出現(xiàn):
      1.盡可能減少血清凍融次數(shù);
      2.培養(yǎng)基無需37℃水浴;
      3.培養(yǎng)基保持最佳PH值7.0-7.2;
      4.嚴格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì),容器定期刷洗;
      5.掌握細胞傳代的理想時機,細胞切勿生長過老。
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